هدف از مطالعه حاضر بررسی شرایط استخراج عصاره هسته زیتون با استفاده از دستگاه هموژنایزر اولتراسونیک و بررسی خصوصیات ضد میکروبی عصارههای دارای بالاترین میزان ترکیبات فنلی بود. طبق نتایج، عصاره اتانولی استخراج شده در زمان 3 دقیقه، دارای بالاترین میزان ترکیبات فنلی میباشد. نوع حلال و مدت زمان استخراج، دارای تاثیر معنیداری (05/0>P)، روی مقدار ترکیبات فنلی عصارههای هسته زیتون میباشد. همچنین، تیمارهای استخراج شده با حلال (آب 0 : اتانول100) در هر سه زمان (1، 2 و 3 دقیقه) و سپس تیمارهای استخراج شده با حلال اتانول80: آب 20 در زمانهای 2 و 3 دقیقه دارای بالاترین میزان ترکیبات فنلی بودند؛ و به عنوان تیمارهای منتخب جهت انجام آزمونهای میکروبی، انتخاب شدند. در ارتباط با خصوصیات ضد میکروبی، طبق نتایج بدست آمده از آزمون انتشار چاهک، هر سه عصاره اتانولی، دارای خصوصیات ضد میکروبی بودند. از سوی دیگر، در آزمون اندازه گیری چگالی نوری که جهت انتخاب تیمار بهینه صورت گرفت، نتایج نشان داد که عصاره اتانولی استخراج شده در زمان 3 دقیقه، دارای بالاترین خاصیت ضدمیکروبی میباشد؛ در نتیجه این عصاره به عنوان بهترین تیمار انتخاب و ترکیبات فنلی آن بوسیله دستگاه GC-MS اندازه گیری شد. نتایج نشان داد که، بیشترین درصد فراوانی ترکیب فنلی در این عصاره مربوط به هیدروکسی تایروزول و تایروزول میباشد.