fiogf49gjkf0d
هدف:باکتري ها کارخانه هاي بي همتاي بيولوژيک در توليد محصولات زيست فناوري هستند. برخي ويژگي ها نظير تحمل شرايط خاص رشد و توليد آنزيم هاي مختلف، باکتريها را جهت توليد و بهره برداري مورد توجه قرار داده است. عده اي از باکتري ها واجد عوامل ژنتيکي با قابليت جابه جايي هستند. از اين عوامل مي توان به اينترون هاي گروه II اشاره کرد که نه تنها به کمک آنزيم هايي که کد مي کنند، قادر به برش خود هستند، بلکه قادرند در محل ديگري از ژنوم باکتري جايگزين شوند. اساس اين جايگزيني، برقراري پيوند هيدروژني بين بخش کوچکي از اينترون و توالي مکمل آن در جايگاه هدف است. اين جابه جايي با مهندسي ژنتيک قابل هدايت مي باشد و از آنجا که قرار دادن توالي خارجي درون اينترون در جابه جايي آن اختلال ايجاد نمي-کند، افق روشني براي ژن درماني پديدار مي شود. از سوي ديگر سه آنزيم با ارزش وارونوشتاز ,(reverse transcriptase) آندونوکلئاز ,(endonuclease) مچوراز (maturase) توسط اين اينترون ها کد مي شود. وجود اينترون هاي مزبور در باکتري هاي ترموفيل، زمينه هاي بهره برداري قابل توجهي را فراهم مي آورد. هدف از اين پژوهش شناسايي باکتري هاي ترموفيل بومي ايران که داراي اينترون گروه II هستند مي باشد.
مواد و روش ها: به منظور شناسايي اينترون گروه II، بخش حفاظت شده آن در باکتري ها با استفاده از نرم افزار هاي بيوانفورماتيک شناسايي و با استفاده از نرم افزار Gene runner پرايمر اختصاصي طراحي شد.DNA ژنومي از باکتري بومي استخراج و PCR در شرايط بهينه انجام گرفت. باکتري هاي دارنده اينترون به منظور شناسايي ژن آنزيم ترانسکريپتاز معکوس، با روش PCR مورد بررسي بيشتر قرار گرفتند.
نتيجه: دو باکتري ترموفيل بومي جدا شده از چشمه هاي آب گرم ايران در بررسي اوليه توسط تکنيک PCR واجد اينترون گروه II بودند. در بررسي بعدي وجود ژن trt که رمز کننده آنزيم ترانس کريپتاز معکوس مي باشد، در اين باکتري ها به اثبات رسيد.
بحث: باکتري هاي بومي مورد بررسي مي توانند جهت همسانه سازي (cloning) ژن trt و توليد آنزيم گرما دوست مورد استفاده قرار گيرد.