برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
تابستان 1386 , دوره  12 , شماره  2 ; از صفحه 139 تا صفحه 151 .
 
عنوان مقاله: 

تخليص و بررسي خصوصيات مولكولي پارااكسوناز سرم انسان

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* گروه بیوشیمی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه اله (عج)، تهران
 
چکیده: 

هدف: هدف تخليص پارااكسوناز -1 سرم انسان كه به نظر مي رسد يكي از آنزيم هاي موثر در خنثي سازي ‏مواد ارگانوفسفات است، مي باشد.‏
روش بررسي: در اين تحقيق دو نوع ستون كروماتوگرافي تعويض آنيوني (‏
DEAE Sephadex A-50‏) و ‏غربال مولكولي (‏Sephadex G-200‏) براي تخليص اين آنزيم مناسب شناخته شد. با استفاده از دترجنت ‏غيريوني، آنزيم از ساختار ليپوپروتئين ‏HDL‏ جدا گرديد. پس از اتصال آنزيم به ستون تعويض يون با ‏شستشوي متناوب پروتئين هاي ناخواسته و غيرمتصل از ستون خارج گرديد. آنزيم مورد نظر با استفاده از ‏شيب غلظتي از كلريدسديم از ستون خارج و فراكسيون هاي فعال جمع و بر روي ستون غربال مولكولي برده ‏شد. فراكسيون هاي فعال خارج شده از اين ستون مجددا بر روي ستون تازه تهيه شده از ميدياي ستون اول ‏‏(‏DEAE Sephadex A-50‏) برده شد. با اين تفاوت كه هم بافر تغيير يافته بود و هم ‏pH‏ بافر شستشو ‏نسبت به مرحله اول كاهش يافته بود.‏
يافته ها: نتايج نشان داد كه حاصل تخليص اين روش كروماتوگرافي، آنزيم با درصد خلوص بيش از 95% و ‏فعاليت ويژه 320 واحد بين المللي در ميلي گرم پروتئين است. با استفاده از ژل پلي آكريل آميد (‏
SDS-PAGE‏) تنها يك باند پروتئيني در محدوده 43 كيلو دالتون مشاهده شد. بررسي مطالعات سينيتيكي نشان ‏داد ميل تركيبي آنزيم با سوبستراهاي مختلف وابسته به بافر و يون كلسيم و سديم است. چنان كه با استفاده ‏از سوبستراي پارااكسون هيدروليز پارااكسون توسط آنزيم تخليص شده وابسته به كلسيم و كلريد سديم بود ‏‏(‏(Km = 1.39 ± 0.52‏. در صورتيكه هيدروليز فنيل استات نياز به كلريد سديم و كلسيم نداشت ‏(‏(Km = 0.728 ± 0.105‏. حد اكثر فعاليت آنزيم براي هيدروليز پارااكسون در محدوده ‏pH‏ برابر 11-5/9 و ‏براي فنيل استات در محدوده 5/8-8 بود. گليسرول 20% (حجمي - حجمي) بهترين پايدار كننده در دماي 25 ‏درجه سانتيگراد شناخته شد. بطوري كه پس از مدت 20 روز در اين دما بيش از 75% فعاليت اوليه آنزيم باقي ‏بود. برعكس در دماي 56 درجه سانتيگراد سولفات آمونيوم عملكرد بهتري را نشان داد. آنزيم تخليص شده ‏توسط غلظت هاي ميكرومولار ‏EDTA‏ و يون روي (‏Zn2+‏) مهار گرديد. غلظت هاي مهاري 50 درصدي ‏‏(‏IC50‏) در حضور كلسيم براي هر دو مهار كننده افزايش يافت.
نتيجه گيري: روش بكار رفته روش ارزان و سريع است بطوري كه مي توان با استفاده از اين روش مقدار ‏زيادي از اين آنزيم را تخليص و آلودگي و مسموميت با ارگانو فسفات ها را از بين برد.‏

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط:  
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 
ارتباط خیلی زیاد ارتباط زیاد مرتبط ارتباط کمتر
 
ارجاعات: 
  • ثبت نشده است
 
استنادات: 
  • ثبت نشده است
 
+جهت ارجاع به این مقاله کلیک کنید(Cite).
APA : کپی

مهرانی، ح.، و گل منش، ل.، و بهرامی، ف.، و تابعی، س. (1386). تخلیص و بررسی خصوصیات مولکولی پارااکسوناز سرم انسان. مجله پزشکی کوثر, 12(2), 139-151. https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=66729



Vancouver : کپی

مهرانی حسینعلی، گل منش لیلا، بهرامی فریده، تابعی سیدمحمد. تخلیص و بررسی خصوصیات مولکولی پارااکسوناز سرم انسان. مجله پزشکی کوثر. 1386 [cited 2021August01];12(2):139-151. Available from: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=66729



IEEE : کپی

مهرانی، ح.، گل منش، ل.، بهرامی، ف.، تابعی، س.، 1386. تخلیص و بررسی خصوصیات مولکولی پارااکسوناز سرم انسان. مجله پزشکی کوثر, [online] 12(2), pp.139-151. Available: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=66729.



 

 
چکیده انگلیسی بازدید یکساله 0 مباني نظري و تجربي ونداليسم: مروري بر يافته هاي يك تحقيق
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی