برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
تابستان 1386 , دوره  12 , شماره  2 ; از صفحه 97 تا صفحه 106 .
 
عنوان مقاله: 

بررسي تمایز سلولهاي بنيادي مزانشيمي جدا شده از مغز ‏استخوان موش به غضروف در كشت سه بعدي با استفاده از ژل آل‍‍‍ژينت

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* گروه سلولهای بنیادی، پژوهشکده رویان، تهران- ایران
 
چکیده: 

هدف: هدف از انجام این مطالعه کشت سه بعدی سلولهاي بنيادي مزانشيمي موشي در داخل ژل آلژينت و بررسي تمايز به غضروف آن مي باشد.
روش بررسي: موشهاي
NMRI با سن تقريبي 6ـ4 هفته قرباني شدند و سلولهاي مغز استخوان آنها با تراكم كم (به تعداد 500 سلول در هرخانه از ظروف 6 خانه اي) كشت شد. با انجام دو پاساژ متوالي، جمعيت خالصي از سلولهاي فيبروبلاستي ظاهر شد. به منظور كشت سه بعدي و تمايز به غضروف، ده ميليون سلول حاصل از پاساژ دو، در ده ميلي ليتر محلول آلژينت معلق شد و سوسپانسيون حاصل به ده قسمت مساوي تقسيم شد و در ظروف 12 خانه اي توزيع گرديد. با استفاده از محلول كلريد كلسيم، سوسپانسيون سلولهاي مزانشيمي به حالت ژل در آمد. به منظور تمايز به غضروف، محيط كندروژنيك حاوي10 نانو گرم فاكتور رشد TGF-B3 و 10 نانوگرم BMP-6 به ژل حاوي سلولهاي مزانشيمي اضافه شد. در پايان مدت كشت (3 هفته)، وقوع تمايز با بهره گيري از روشهاي رنگ آميزي اختصاصي تولوئيدن بلو، تكنيك RT-PCR و فراساختار مورد ارزيابي قرار گرفت.
يافته ها: در كشت اوليه سلولهايي با مورفولوژي چند ضلعي، كشيده، پهن و دوكي مشاهده شد. با انجام اولين پاساژ، جمعيت نسبتا خالصي از سلولهاي دوكي ظاهر شد و دومين پاساژ سبب شد تا به اندازه كافي سلول براي مرحله بعدي مطالعه فراهم شود. نتايج رنگ آميزي تولوئيدن بلو نشان داد كه سلولها در درون ژل در داخل ساختارهاي شبه لاكونايي قرار گرفته اند و اطراف آنها، با مناطق متاكروماتيك احاطه شده است. ژل آلژنيت خود به حالت متاكروماتيك ظاهر شد. همچنين نتايج RT-PCR نشان داد كه mRNA كلاژن تايپ II، X و aggrecan به ميزان زيادي در سلولهاي تمايز يافته توليد شده است. از طرفي بررسي برشهاي ظريف حاكي از اين بود كه سلولهاي تمايز يافته در مركز كشت سه بعدي، داراي دستگاههاي ترشحي رشد كرده بودند كه بيانگر وضعيت نسبتا فعال آنها بود. 
 نتيجه گيري: سلولهاي مزانشيمي موشي، در كشت سه بعدي در داخل ژل آلژينت، به راحتي فنوتيپ غضروف را كسب مي نمايند. نكته جالب توجه اين است كه در پايان دوره تمايز، سلولها از لحاظ فراساختاري فعال به نظر مي رسند.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
-
 
ارجاعات: 
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 137
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی