تعيين آنتي ژن و DNA در توكسوپلاسما گوندي در مرحله حاد عفونت در انسان

زمينه و هدف: توكسوپلاسما گوندي از تك ياخته هاي ايجاد كننده بيماري در انسان و بسياري از حيوانات خونگرم است. ابتلا به عفونت در زنان باردار سبب ايجاد عوارض شديد مغزي و عصبي در جنين مي شود. همچنين فعال شدن عفونت در افراد مبتلا به نقص ايمني،‌ باعث توكسوپلاسموز منتشر مي گردد. تشخيص سريع عفونت در مرحله حاد، درمان سريع و بهبود بيماري را به دنبال دارد. در اين رابطه تشخيص انگل و اجزاي آن،‌ تعريف بهتري از عفونت حاد بدست مي دهد.
روش كار: در اين بررسي، 20 نمونه سرم از افراد مبتلا به توكسوپلاسموز حاد جمع آوري شد. آنتي ژن محلول توكسوپلاسما با استفاده از روش سونيكاسيون از تاكي زوئيت هاي سويه RH استخراج شد. تعدادي خرگوش با اين آنتي ژن ايمن شدند. آنتي بادي پلي كلونال با استفاده از روش هاي رسوب سرم در نمك و كروماتوگرافي تبادل يوني از سرم خرگوش ها استخراج شد. آزمون ايمنوبلاتينگ با استفاده از اين آنتي بادي براي تشخيص آنتي ژن توكسوپلاسما راه اندازي شد. آزمون PCR با استفاده از يك جفت پرايمر از ژن B1 تك ياخته براي تشخيص وجود DNA در آن در اين نمونه سرم ها انجام شد.
نتايج: در يك نمونه از اين بيست سرم نوار قوي 30 كيلو دالتوني آنتي ژن با روش ايمنوبلاتينگ مشاهده شد. در اين سرم قطعه 570pb حاصل از تكثير DNA در انگل با روش PCR نيز مشاهده گرديد. اين نتايج مثبت در هر دو آزمون مربوط به فردي بود كه در محيط آزمايشگاه با سويه تقريبا بيماريزاي C56 به صورت اتفاقي آلوده شده بود و در فاز حاد بيماري قرار داشت.
نتيجه گيري: نتايج حاصل از اين بررسي نشان داد كه توكسوپلاسموز در مرحله حاد با روش هاي ايمنوبلاتينگ و PCR قابل تشخيص است كه اين امر در تشخيص و درمان توكسوپلاسموز مادرزادي و در مبتلايان به نقص سيستم ايمني نقش حياتي دارد.