مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
عنوان مقاله: 

مطالعه طيف سنجي دئوکسي ريبوزيم محدود کننده: بررسي ساختار و فعاليت

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* گروه بیوفیزیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران
 
چکیده: 
دئوکسي ريبوزيم محدود کننده وابسته به کوفاکتور مس از منحصر به فرد ترين دئوکسي ريبوزيمهاي شناخته شده ميباشد. ويژگي اين آنزيم برش اختصاصي تک رشته DNA و تشکيل ساختار DNA سه رشته است که براي شناسايي سوبسترا ضروري ميباشد. روش معمول براي سنجش فعاليت دئوکسي ريبوزيمها (با سوبستراي اسيدنوکلئيکي) بر پايه استفاده از سوبستراهاي نشاندار راديواکتيو ميباشد که داراي پيچيدگيها و مشکلاتي است. در مطالعه حاضر، با استفاده از طيف سنجي فلورسانس خارجي و جذب فرابنفش، روشهايي دقيق، سريع و ارزان براي مطالعه فعاليت آنزيم ارائه شده است. با توجه به اهميت کليدي ساختار اين آنزيم در شناسايي و اتصال به سوبسترا با تشکيل ساختار سه رشته اي DNA، براي مطالعه ساختاري آنزيم از روش طيف سنجي دو رنگ نمايي دوراني استفاده شد. طيفهاي به دست آمده از اين روش نشان دهنده تغييرات ساختاري و شاهدي بر تشکيل DNA سه رشته در کمپلکس آنزيم-سوبسترا است. نشانگر سايبرگولد داراي تمايل بالاي اتصال به DNA دو رشته در مقايسه با DNA تک رشته است. از تغييرات نشر فلورسانس سايبرگولد بعد از افزودن کوفاکتور به کمپلکس آنزيم-سوبسترا ميتوان ميزان فعاليت آنزيم را سنجيد. در روش سنجش پررنگ شدگي پيوسته که بر پايه طيف سنجي فرابنفش است از پررنگ شدگي ايجاد شده پس از افزودن کوفاکتور به کمپلکس آنزيم-سوبسترا براي اندازه گيري فعاليت آنزيم استفاده شده است. نتايج نشان دهنده دقت بالاي روش سنجش پررنگ شدگي نسبت به طيف سنجي فلورسانس خارجي است، به اين دليل که روش سنجش پررنگ شدگي بر پايه استفاده از ويژگيهاي فيزيکوشيميايي DNA و بدون دخالت عوامل خارجي مي باشد.
 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
-
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  بازدید یکساله 30
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی