محافظت موشهاي BALB/c در مقابل ليشمانيوز پوستي با استفاده از ليپوزومهاي حاوي گليكوپروتئين سطحي اصلي ليشمانيا نوتركيب (rGP63) تهيه شده به روش انحلال با دترژنت

هدف اصلي اين مطالعه تهيه يك فرآورده ليپوزومي حاوي (Major surface glycoprotein of leishmania recombinant) rGP63 است كه بتواند در موشهاي BALB/c به صورت اختصاصي باعث القاي ايمني سلولي شود و موشها را در مقابل چالش با انگل زنده ليشمانيا ماژور محافظت كند. ليپوزومهاي حاوي rGP63 با استفاده از لسيتين و كلسترول، با نسبت مولي 1:1، با استفاده از روش تبخير حلال (Multilamellar vesicles, MLV-rGP63) تبخير فاز معكوس (Large unilamellar vesicles, LUV-tGP63) و انحلال با دترژنت (Small unilamellar vesicles, SUV-rGP63) تهيه شدند. فرآورده هاي ليپوزومي حاوي (2 μg) rGP63، rGP63 خالص به تنهايي در (2 μg) PBS و ليپوزوم خالي (ليپوزوم بدون (rGP63 به عنوان كنترل به صورت زير جلدي به موشهاي BALB/c در گروه هاي 10تايي سه مرتبه به فاصله 3 هفته از هم تزريق شدند. سه هفته بعد از آخرين تزريق ايمن سازنده تست ازدياد حساسيت تاخيري (Delayed type hypersensitivity, DTH) با تزريق 2 µg از rGP63 در كف پاي چپ موش و(Phosphate buffer saline) PBS  به عنوان كنترل در كف پاي راست به صورت زير جلدي انجام گرفت و ميزان تورم حاصل در پاي موشها 24، 48 و 72 ساعت پس از تزريق اندازه گيري شد. يك هفته بعد از تست DTH موشها با تزريق پروماستيگوتهاي زنده ليشمانيا ماژور (1×⁶10.50 μl) در كف پاي چپ به صورت زيرجلدي تحت چالش قرار گرفتند. ميزان تورم و زخم در پاي موشها به صورت هفتگي به مدت 10 هفته اندازه گيري شد. آناليز نتايج DTH نشان داد كه در بين گروه هاي مختلف فرآورده ليپوزومي SUV-rGP63 در مقايسه با گروه هاي كنترل بيشترين تأثير را در ايجاد پاسخ DTH مثبت در هر سه نوبت اندازه گيري دارد (P<0.01)، پاسخ گروه هاي LUV-rGP63 و rGP63 نيز در هر سه نوبت مثبت بود (P<0.05)، ولي پاسخ MUV-rGP63 نسبت به بقيه گروه ها كمتر بود و پاسخ DTH مثبت اين گروه فقط در زمانهاي 24 و 48 ساعت بارز بود(P<0.05) . در تست چالش با انگل زنده گروه SUV-rGP63 اثر محافظتي كامل داشت (P<0.001) ولي دو فرآورده ليپوزومي LUV-rGP63 و MUV-rGP63 اثر محافظتي جزئي نشان دادند كه از نظر آماري بارز نبود و خود rGP63 به تنهايي فقط به صورت نسبي (P<0.05) باعث محافظت موشها شد. اين نتايج نشان مي دهد كه ليپوزومهاي تهيه شده به روش انحلال با دترژنت مي توانند ايمونوادجوانتهاي مناسب براي rGP63 براي تحريك ايمني سلولي و محافظت در موشها در مقابل ليشمانيوز پوستي باشند.