3 SID.ir | جداسازي سلولهاي بنيادي جنين موش در مرحله بلاستوسيست

مشخصات مقاله

 
عنوان مقاله: 

جداسازي سلولهاي بنيادي جنين موش در مرحله بلاستوسيست

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
 
چکیده: 

مقدمه: سلولهاي بنيادي جنين، سلولهاي چند ظرفيتي هستند كه از جنين در مراحل اوليه تكوين تهيه مي‌شوند و داراي ويژگي‌هاي منحصر به فردي مي‌باشند: از جمله توانايي تمايز به انواع رده‌هاي سلولي و نيز استفاده آنها در آزمايشات دستكاري ژنتيكي كه به همين دليل از اين سلولهاي در توليد جانوران ترانس ژن و نيز سلول درماني استفاده ميِ‌شود. هدف اصلي اين تحقيق جداسازي، كشت و توليد سلول‌هاي جنيني بوده كه براي اولين بار در ايران انجام شده، لذا مي‌توان در تحقيقات بعدي از آنها استفاده نمود.

روش بررسي: تعداد 385 جنين در مرحله بلاستوسيست از موش‌هاي حامله‌ي نژاد NMRI تهيه شده و در محيط DMEM حاوي 10% سرم جنين گاو به مدت 24 ساعت كشت شدند. 2 تا 4 روز پس از خروچ جنين‌ها از زونا پلوسيدا، سلول‌هاي توده داخل سلولي (Intre Cell Mass) تشكيل كلون داده كه بر اساس مرفولوژي مورد شناسايي قرار گرفتند. پس از تريپسينه شدن، سلول‌هاي مذكور با دو روش متفاوت جهت به دست آوردن كلون سلول‌هاي بنيادي جنيني كشت داده شدند. در روش اول، حدود 50 توده داخل سلولي پس از تريپسينه شدن بر روي سلول‌هاي فيبروبلاست اوليه جنين موش كه قبلا فعاليت ميتوزي آنها با استفاده از ميتومايسين متوقف شده بود منتقل شد. در روش دوم، تعداد 335 توده داخل سلولي پس از تريپسينه شدن در محيط كشت DMEM حاوي 10% سرم جنين گاو و Leukemia Inhibitory Eactor به ميزان1000 u/ml  و 0.1 ميلي مول بتامر كاپتواتانول كشت داده شدند. پس از ظهور كلون‌هاي مربوط به سلول‌هاي بنيادي جنيني در هر يك از روشهاي مذكور، چندين ساب كالچر از آنها تهيه و به روش هيستوشيمي آلكالن فسفاتاز مورد شناسايي قرار گرفتند.

يافته‌ها: نتايج حاصل از اين تحقيق نشان داد كه روش اول موفق نبود اما مي‌توان با روش دوم از بلاستوسيست موش نژاد NMRI سلول‌هاي بنيادي را جدا و تكثير نمود، گرچه درصد كمي كلون سلولي ايجاد شدند. همچنين استفاده از بلاستوسيست اوليه جنين موش به عنوان لاية پشتيبان به تنهايي در جلوگيري و مهار تمايز و همچنين فرايند تكثيري سلول‌هاي بنيادي جنيني در نژاد NMRI موثر نبود.

نتيجه‌گيري: در مجموع مي‌توان با بهبود شرايط، به توليد سلول‌هاي بنيادي جنين موش پرداخت و از آنها در مطالعات پايه‌اي مثل تمايزشان به رده‌هاي خاص سلولي، توليد جانوران ترانس ژن، سلول درماني، ايجاد تغييرات ژني هدفمند (Gene Targeting) و غيره استفاده نمود.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 319
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی