3 SID.ir | استخراج و خالص سازي آنزيم DNA پلي مراز از باسيلوس استیروترموفیلوس جدا شده از آب گرم استخر گاومیش شهر سرعین

مشخصات مقاله

 
عنوان مقاله: 

استخراج و خالص سازي آنزيم DNA پلي مراز از باسيلوس استیروترموفیلوس جدا شده از آب گرم استخر گاومیش شهر سرعین

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
 
چکیده: 

با توجه به نقش آنزيم DNA پلي مراز در همانندسازي DNA در تحقيقات مولكولي آنزيم هاي DNA  پلي مراز خصوصا انواع مقاوم به حرارت از اهميت بسزايي برخوردارند. در اين تحقيق، از باكتري باسيلوس استيروترموفيلوس مقاوم به حرارت، جدا شده از آب گرم استخر گاوميش شهر سرعين استان اردبيل آنزيم DNA پلي مراز مقاوم به حرارت استخراج و تخليص گرديد به همين منظور باكتريها در محيط Luria- Bertani broth در دماي ºC55 كشت داده شدند و در فاز لگاريتمي برداشته شدند. نتيجتا بيست گرم خمير باكتري به دست آمد و در بافر مربوطه به صورت سوسپانسيون در آورده شد سپس با استفاده از ليزوزيم و سونيكاسيون عصاره خام سلولي تهيه گرديد بعد به كمك رسوب با سولفات آمونيوم و سه مرحله كروماتوگرافي به ترتيب با - DEAE سفادكس، فسفوسلولز و هپارين سفاروز خالص سازي عصاره خام سلولي صورت گرفت. آنزيم DNA پلي مراز 127 برابر تخليص گرديد و در نهايت آنزيم با فعاليت ويژه 223 (U/mg) تهيه شد DNA پلي مراز استخراجي در دماي 55 ºC بيشترين فعاليت را از خود نشان داد. با استفاده از SDS-PAGE سه باند پروتئيني بدست آمد كه وزن مولكولي باند اصلي حدود 76000 دالتون بود. از آنزيم DNA پلي مراز باسيلوس استيروترموفيلوس ميتوان در همانندسازيDNA ،  site directed mutagenesisو DNA sequencing در دماي بالا استفاده نمود.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 380
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی