کلونينگ و تعيين توالي ژن متالوپروتئاز مقاوم به گرما از باکتري Anoxybacillus flavithermus به دست آمده از چشمه آب گرم قينرجه، مشگين شهر

در موجودات گرمادوست، غالبا بيوماکرومولکول ها مقاوم به حرارت هستند. اين بيوماکرومولکول ها علاوه بر دماي بالا، در شرايط به شدت قليايي يا اسيدي نيز در برابر دناتوره شدن مقاومت مي کنند. پروتئازهاي پايدار حرارتي پتانسيل قابل توجهي براي بسياري از صنايع غذايي، توليد کاغذ و شوينده ها، حذف ضايعات سمي و حفاري نفت دارند. اين آنزيم ها را مي توان از طريق بهينه سازي تخمير گرمادوست در ميکروارگانيسم ها و يا کلون کردن به روش تکنولوژي DNA نوترکيب در يک ميزبان مزوفيل به حداکثر توليد رساند. متالوپروتئازها نيز نوعي پروتئاز وابسته به يون هستند. متالوپروتئازي که در مطالعه حاضر مورد بررسي قرار گرفت يک اندوپپتيداز وابسته به يون روي است. ژن متالوپروتئاز از باکتري Anoxybacillus flavithermus کلون شد. از روش PCR براي تکثير ژن استفاده شد. يک جفت پرايمر با جايگاه برش براي آنزيم هاي NheI و XhoI طراحي شد، در وکتور pET21a (+) کلون شد و به ميزبان BL21 ترانسفورم شد. نتايج حاصل از آناليز توالي ژن کلون شده حاکي از تشابه ژن مورد نظر با پروتئاز واريانت هاي مختلف گونه Anoxybacillus flavithermus دارد.