کميت سنجي قارچ Verticillium dahliae در ريشه چهار رقم زيتون با استفاده از تکنيک Real- time PCR

پژمردگي ورتيسليومي يکي از بيماري هاي مهم زيتون است که با تخريب آوندها باعث خشکيدگي شاخه ها، کاهش عملکرد و در نهايت مرگ درختان بيمار ميشود. در اين تحقيق ابتدا از درختان زيتون مشکوک به پژمردگي ورتيسيليومي در منطقه طارم در استان زنجان نمونه برداري شد. پس از کشت و خالص سازي قارچ، استخراج دي ان ا با روش سي تب انجام شد. براي ارزيابي واکنش ارقام زيتون، ريشه نهال هاي پنج ماهه ارقام زرد، آربيکن، آبلونکا و کرونايکي به روش غوطه ور سازي با سوسپانسيون 107 اسپور جدايه برگريز قارچ عامل بيماري تلقيح گرديد. استخراج دي ان ا از ريشه نهال هاي تلقيح شده بلافاصله و سپس در زمان هاي 2-7-15-27-41-56-77 روز بعد از تلقيح انجام گرديد. روند افزايش تدريجي ميزان دي ان ا قارچ موجود در ريشه نهال ها با روش Real- time PCR و با استفاده از سايبرگرين همراه با آغازگرهاي اختصاصي کميت سنجي گرديد. نتايج بررسي نشان داد که در طول زمان، نسبت دي ان ا قارچ به دي ان ا کل در ارقام زرد و آربيکن نسبت به ابلونکا وکرونايکي افزايش بيشتري داشتند و رقم کرونايکي محدوديت بيشتري براي استقرار پاتوژن در روي ريشه ايجاد نمود. با اين حال در روي ريشه رقم زرد، قارچ عامل بيماري توانست با سرعت بيشتري تکثير يافته وعلايم شديدتري از بيماري را ظاهر سازد. نتايج اين بررسي نشان داد که تکنيک Real-time PCR ابزار مناسبي براي ارزيابي مقاومت ژنوتيپ هاي مختلف زيتون نسبت به بيماري پژمردگي ورتيسليومي است که مي تواند در کنار روش هاي معمول براي غربالگري ارقام مقاوم به بيماري مورد استفاده قرار گيرد.