برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
پاييز 1393 , دوره  4 , شماره  16 ; از صفحه 61 تا صفحه 66 .
 
عنوان مقاله: 

مطالعه و ارزيابي کلون کردن ژن آنزيم -L آسپاراژيناز Escherichia coli ?? در Bacillus subtilis

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* دانشگاه آزاد، واحد دامغان، بخش میکروبیولوژی
 
چکیده: 

سابقه و هدف: ال-آسپاراژيناز ?? کاربرد موثري در درمان لوسمي لنفوبلاستيک (ALL) دارد. اين آنزيم از منابع باکتريايي جدا شده و به صورت تجاري به عنوان داروي ضدسرطان عرضه مي شود. سلول هاي سرطاني برخلاف سلول هاي نرمال، نياز شديدي به ال-آسپاراژين دارند، در صورت به کارگيري ال-آسپاراژيناز (E.C. 3.5.1.1) ال-آسپاراژين به ال-آسپارتات و آمونيوم تبديل مي شود که در نهايت به تخريب سلول هاي سرطاني منجر مي شود. هدف از اين پژوهش، کلون کردن ژن ال-آسپاراژيناز E. coli II در B. subtilis جهت توليد انبوه اين آنزيم انجام گرفت.
مواد و روش ها: ژن ال-آسپاراژيناز
ansB II) ) با روش PCR از E. coliBL21 جدا گرديد. قطعه تکثير يافته و شاتل وکتور بياني pMR12 توسط آنزيم هاي Hind???،BamH? هضم شد. واکنش اتصال بين قطعه PCR و شاتل وکتور بياني برش خورده با روش استاندارد انجام گرفت. در مرحله بعد، وکتور نوترکيب با روش شوک با CaCl2 سرد بهE. ColiJM101 ترانسفورم شد. در نهايت به ميزبان B. subtilis با روش شيميايي انتقال يافت.
يافته ها: در اين مطالعه، ژن
ansB به وسيله PCR از E. coliBL21 جدا و توسط تجزيه و تحليل آنزيمي محصول PCR تاييد گرديد و در شاتل وکتور بياني pMR12 کلون شد. سپس وکتور نوترکيب ابتدا در E. coli کلون گرديد و وجود ژن 1047bp با تجزيه و تحليل آنزيمي و واکنش PCR تاييد شد به دنبال آن داخل B. subtilis کلون شد و استخراج پلاسميد انجام گرفت و با باند شاتل وکتور بياني pMR12 داراي ژن ansB به صورت صحيح، مقايسه و تاييد گرديد.
نتيجه گيري: در اين تحقيق با استفاده از شاتل وکتور بياني
pMR12 توانستيم ژن ansB را در B. subtilis کلون کنيم. اين مطالعه، اولين گزارش کلونينگ ژن ansB در B. subtilis است.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 135
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی