بررسي اثر مليتين استخراج شده از زهر زنبور عسل ايراني روي سويه هاي کلينيکي سودوموناس آئروژينوزا

رضايي مرضيه; بيات منصور; شهباززاده دلاور; مومن زاده محسن; اكبري رضا; پوشنگ باقري كامران

مشخصات مقاله

عنوان نشریه:

ميكروبيولوژي دامپزشكي (پژوهشنامه دامپزشكي گرمسار) : پاييز و زمستان 1393 , دوره 10 , شماره 2 (پياپي 29) ; از صفحه 131 تا صفحه 142 .

عنوان مقاله:

بررسي اثر مليتين استخراج شده از زهر زنبور عسل ايراني روي سويه هاي کلينيکي سودوموناس آئروژينوزا

نویسندگان:

رضايي مرضيه, بيات منصور, شهباززاده دلاور, مومن زاده محسن, اكبري رضا, پوشنگ باقري كامران*

آدرس:

* آزمایشگاه ونوم و بیومولکول‌های درمانی، گروه بیوتکنولوژی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

چکیده:

عفونت هاي ناشي از سودوموناس آئروژينوزا از بيمارستان هاي زيادي گزارش شده و با توجه به طبيعت فرصت طلب بودن آن افراد داراي ضعف سيستم ايمني درمعرض خطر هستند. استفاده نابجا از آنتي بيوتيک ها به همراه مکانيسم هاي جهش پيچيده در جنس سودوموناس سبب بوجود آمدن گونه هاي مقاوم به آنتي بيوتيک شده است. در خلال دهه گذشته جستجو جهت يافتن آنتي بيوتيک هاي پپتيدي طبيعي بيشتر مورد توجه قرار گرفته است. هدف از اين مطالعه بررسي اثر مهاري و کشندگي پپتيد مليتين بر سويه هاي باليني سودوموناس آئروژينوزا بود. بدين منظور 48 سويه مورد بررسي از يک مطالعه قبلي در دسترس بودند. پس از تهيه زهر زنبور و آماده سازي آن، کيفيت زهر با تست SDS-PAGE بررسي شد. سپس با استفاده از کروماتوگرافي مايع با کارايي بالا در فاز معکوس (RP-HPLC) پپتيد مليتين جداسازي گرديد. سپس کيفيت مليتين استخراج شده با استفاده از SDS-PAGE بررسي گرديد. حداقل غلظت مهاري و کشندگي مليتين با روش ميکرودايلوشن براث و شمارش کلني تعيين گرديد. حدود بيست فراکشن از زهر زنبور عسل تخليص گرديد که پپتيد مليتين اصلي ترين فراکشن زهر بود. MIC₅₀ کل سويه هاي حساس، سويه هاي موکوئيدي و غيرموکوئيدي حساس به مليتين به ترتيب 12.5، 6.25، و 12.5 ميکروگرم بدست آمد. 94.73 درصد سويه هاي موکوئيدي و 86.2 درصد سويه هاي غير موکوئيدي نسبت به مليتين حساس بودند. MBC₅₀ در کل نمونه هاي حساس، سويه هاي موکوئيدي و غيرموکوئيدي حساس به مليتين به ترتيب 50، 37.5 و 50 ميکروگرم بدست آمد. 58/89 درصد از سويه ها حساس به مليتين بوده و رشد 10.41 درصد از آنها در حضور مليتين مهار نگرديد. با استفاده از نتايج تست MIC و MBC مشخص شد که مليتين اثر قابل توجه مهاري و کشندگي بر رشد سودوموناس آئروژينوزاهاي جداشده از بيماران مختلف داشته است. آناليز نتايج نشان داد که رشد سويه هاي موکوئيدي با مقدار کمتري از مليتين مهار مي گردد. اين سويه ها بدليل وجود لايه هاي پلي ساکاريدي در اطراف خود، نفوذپذيري کمتري به آنتي بيوتيک ها داشته و مقاومت بيشتري از خود نشان مي دهند. نتايج اين پژوهش از اين لحاظ با ارزش است که اميد جهت درمان عفونت هاي سودوموناسي در مبتلايان به بيماري سيستيک فايبروزيس را افزايش مي دهد.