3 SID.ir | ارزيابي کمي و بهينه سازي تشخيص DNA آسپرژيلوس فوميگاتوس در نمونه خون با استفاده از تکنيک Real time PCR

مشخصات مقاله

 
عنوان مقاله: 

ارزيابي کمي و بهينه سازي تشخيص DNA آسپرژيلوس فوميگاتوس در نمونه خون با استفاده از تکنيک Real time PCR

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* ساری، کیلومتر 18 جاده خزرآباد، دانشکده پزشکی، گروه انگل شناسی و قارچ شناسی
 
چکیده: 

سابقه و هدف: آسپرژيلوزيس مهاجم عفونت فرصت طلب جدي ناشي از گونه هاي مختلف قارچ آسپرژيلوس است که اغلب در افراد داراي نقص سيستم ايمني رخ مي دهد. اساسا، تشخيص سريع و زودرس آن، از پيشرفت اين عفونت قارچي جلوگيري بعمل مي آورد. هدف از اين مطالعه تعيين کمي و بهينه سازي DNA آسپرژيلوس فوميگاتوس در خون با استفاده از تکنيک Real time PCR بود.
مواد و روش ها: پنج ميلي ليتر خون داوطلب سالم را با رقت هاي مختلفي از کونيدي هاي آسپرژيلوس فوميگاتوس (106 تا 101) آلوده شد. استخراج DNA از خون با استفاده از گلوله شيشه اي و کيت QIAmp DNA Blood Mini Kit انجام شد. پرايمر و پروب هاي هيبريديزاسيون براي تکثير سکانس هاي اختصاصي گونه متعلق به ژن18S rRNA  آسپرژيلوس فوميگاتوس طراحي و با استفاده از روشReal time  و تکنيک FRET مورد بررسي قرار گرفت.
يافته ها: تمامي واکنش هاي PCR با DNA ديگر گونه هاي قارچي منفي بودند که نشان دهنده اختصاصيت 100 درصد اين روش بود. آناليز دماي ذوب آسپرژيلوس فوميگاتوس تنها در يک نقطه حداکثر سيگنال دمايي را با پروب در دماي 69.16oC نشان دادکه به تشخيص آسپرژيلوس فوميگاتوس کمک مي کند. حداقل مقدار DNA (100fg) CFU 110 معادل 10 کونيدي يا سلول در هر واکنش PCR مشخص گرديد که نشان دهنده حساسيت بالاي اين روش مي باشد.
استنتاج: روش Real time PCR با بکارگيري پروب هاي هيبريديزاسيون داراي اختصاصيت و حساسيت بالا براي اندازه گيري بار قارچي جهت تشخيص زودرس و مانيتورينگ درمان مي باشد.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 258
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی