برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
فروردين 1388 , دوره  7 , شماره  2 ; از صفحه 112 تا صفحه 116 .
 
عنوان مقاله: 

ساخت وکتورهاي نوترکيب واجد ژن تنظيم کننده آنتي بيوتيک کلاولانيک اسيد، claR، جداشده از سوش هاي استرپتومايسز کلاولي جروس (مقاله كوتاه)

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران
 
چکیده: 

ژن claR موجود در دسته ژني کلاولانيک اسيد يک تنظيم کننده الگوبرداري را در استرپتومايسز کلاولي جروس کد مي نمايد که ساخت کلاولانيک اسيد را کنترل مي نمايد. هدف اصلي در اين تحقيق نيز جدانمودن و تاييد ملکولي ژن claR و همچنين کلونينگ آن در يک وکتور مخصوص استرپتومايسز (pMA::hyg) بود. در ابتدا پرايمرهاي مناسب با توجه به کدان شروع ژن، طراحي گرديدند. در ابتدا DNA ژنومي را استرپتومايسز کلاولي جروس استخراج گرديد، و سپس با استفاده از واکنشهاي زنجيره اي پلي مراز (PCR)، ژن claR تکثير گرديد. ساختار ژن claR تکثير شده توسط PCR آشيانه اي و چند شکلي طول قطعات محدود ايجاد شده از محصول PCR (PCR-RFLP) تاييد گرديده و ترادف آن نيز کاملا مشخص گرديد. يک مخلوط اتصالي واجد ژن claR جداشده و وکتور pMA::hyg برش داده شده، تهيه گرديد. سلول هاي مستعد Escherichia coli با اين مخلوط اتصالي ترانسفورم شدند. سرانجام، حضور وکتور نوترکيب در کلوني هاي ترانسفورم شده با روش Colony-PCR تاييد گرديد. ژن claR از استرپتومايسز کلاولي جروس DSM41826 نيز جدا شد و پس از تاييد ساختار و همچنين تعيين ترادف آن به همان روشهاي ذکر شده بالا، کلون نيز گرديد. وکتور pMA::hyg يک وکتور چند منظوره است، به طوري که با همانند سازي در E.coli، چندين نمونه از خود در يک سلول ايجاد مي نمايد. ولي همين وکتور قادر به همانند سازي در استرپتومايسز نبوده و به صورت تداخلي عمل مي نمايد. بنابراين، از اين وکتورهاي نوترکيب مي توان در جهش زايي هاي هدفمند و روش هاي مختلف جايگزيني ژني در استرپتومايسز کلاولي جروس استفاده نمود.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
-
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 93
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی