برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
 
عنوان مقاله: 

جداسازي، کلونينگ و بيان FVII نوترکيب انساني در سيستم بياني باکولوويروس

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* تهران، سازمان انتقال خون ایران، مرکز تحقیقات
 
چکیده: 

زمينه و هدف: فاکتور VII يکي از عوامل انعقادي مهم در مسير خارجي انعقاد خون است که مي تواند با فعال کردن FX نياز بيماران هموفيل را به فاکتورهاي VIII و IX رفع نمايد. بيان نو ترکيب اين فاکتور مشکلات موجود در تهيه فاکتور هاي مذکور از پلاسما (با توجه به ميزان اندک آن ها) و همچنين خطر انتقال بيماري هاي خوني را برطرف مي سازد. لذا هدف از اين پژوهش بيان فاکتور مذکور به صورت نو ترکيب و در سطح بالا با استفاده از فناوري Gateway و TOPO cloning مي باشد.
مواد و روش ها: در اين تحقيق تجربي،
cDNA فاکتور VII از رده سلولي کبدي HepG2 به کمک PCR جدا شد و سپس با تکنيک TOPO Cloning ژن مورد نظر در ساختمان ناقل پروکاريوتي قرارگرفت. ناقل نوترکيب پس از غربالگري براي كلوني هاي باكتريايي استخراج و از آن براي انجام واکنش نوتركيبي LR با ناقل بياني باکولوويروس در فناوري Gateway استفاده شد. ويروس نوترکيب به ميزبان حشره انتقال و پس از غربالگري هاي لازم بيان پروتئين بررسي گرديد. نتايج آناليز بيان پروتئين با الايزا به صورت تکرار سه تايي (انحراف معيار ± ميانگين) ارايه و تفاوت بين گروه ها با استفاده از آزمون آماري تي استيودنت تحت نرم افزار SPSS مورد مطالعه قرار گرفت.
يافته ها: نتايج حاصل از تست
PCR براي واکنش هاي کلونينگ و نو تركيبي همگي حاکي از کلونينگ ژن فاکتور VII با بازدهي بيش از 90 درصد در ساختار ناقل هاي مورد استفاده بودند. آناليز هاي انجام شده براي بيان پروتئين توسط الايزا، SDS-PAGE و وسترن بلات بيان بالاي اين فاکتور را (30 mg/mL) تاييد نمودند. نتايج حاصل از آناليز الايزاي نمونه هاي کشت آلوده تفاوت معناداري را با کنترل منفي نشان مي دادند (P<0.001) و بيشترين سطح بيان در روز هفتم (1.960±0.076) به دست آمد.
نتيجه گيري: يافته هاي حاصل از آناليز بيان پروتئين نو ترکيب به کمک سيستم بياني باکولوويروس نمايانگر توليد آن در مقياس بسيار وسيع تر نسبت به سيستم هاي بياني مشابه يوکاريوتي و پروکاريوتي است
.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
Cite:
APA : کپی

مسروری، ن.، و کامیاب، ا.، و حلبیان، ر.، و شکرگزار، م.، و پریور، ک.، و محمدی پور، م.، و حبیبی رودکنار، م. (1387). جداسازی, کلونینگ و بیان FVII نوترکیب انسانی در سیستم بیانی باکولوویروس. دانشگاه علوم پزشکی سبزوار (اسرار), 15(3 (مسلسل 49)), 152-157. https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=91252



Vancouver : کپی

مسروری ناصر، کامیاب احمدرضا، حلبیان راحله، شکرگزار محمدعلی، پریور کاظم، محمدی پور مهشید، حبیبی رودکنار مهریار. جداسازی, کلونینگ و بیان FVII نوترکیب انسانی در سیستم بیانی باکولوویروس. دانشگاه علوم پزشکی سبزوار (اسرار). 1387 [cited 2021April20];15(3 (مسلسل 49)):152-157. Available from: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=91252



IEEE : کپی

مسروری، ن.، کامیاب، ا.، حلبیان، ر.، شکرگزار، م.، پریور، ک.، محمدی پور، م.، حبیبی رودکنار، م.، 1387. جداسازی, کلونینگ و بیان FVII نوترکیب انسانی در سیستم بیانی باکولوویروس. دانشگاه علوم پزشکی سبزوار (اسرار), [online] 15(3 (مسلسل 49)), pp.152-157. Available: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=91252.



 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

 
چکیده انگلیسی بازدید یکساله 129 مباني نظري و تجربي ونداليسم: مروري بر يافته هاي يك تحقيق
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی