برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
 
عنوان مقاله: 

جداسازي، كلونينگ و بيان ژن فاكتور VII انعقادي نوتركيب انساني در رده سلولي CHO

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران
 
چکیده: 

سابقه و هدف: فاكتور VII، يك گليكوپروتئين پلاسمايي است كه در آبشار انعقادي تشكيل فيبرين، شركت دارد. فاكتور VII در مسير انعقادي نقش مهمي داشته و آغازگر مسير خارجي انعقاد است. هدف اساسي اين مطالعه جداسازي و كلونينگ فاكتور VII نوتركيب انساني و بيان آن در رده سلولي يوكاريوتي CHO جهت بيان فاكتور VII نوتركيب (FVII) بود.
مواد و روش ‌ها: مطالعه انجام شده از نوع تجربي بود. ابتدا
cDNA ژن فاكتور VII از رده سلولي كبد انسان (HepG2) جدا شده و در وكتور (+) 3.1 pcDNA كلون شده سپس وكتور نوتركيب به داخل سلول ‌هاي CHO ترانسفكت شد. در نهايت، يك كلون سلولي كه به طور پيوسته فاكتور VII را بيان مي ‌كند تثبيت شد. بيان فاكتور VII نوتركيب توسط روش‌ هاي RT-PCR، الايزا، SDS-PAGE و وسترن بلات مورد بررسي قرار گرفت. هم چنين تاييد فعاليت بيولوژيكي فاكتور VII نوتركيب توسط آزمايش PT و ايجاد لخته در پلاسماي فاقد فاكتور VII صورت گرفت.
يافته ‌ها: نتايج به دست آمده نشان ‌دهنده كلونينگ و بيان موفقيت ‌آميز ژن فاكتور
VII بود. پس از 3 هفته كشت سلول‌ هاي CHO در حضور جنتيسين، كلون سلول‌ هاي پايدار به دست آمد. نتايج آزمايش‌ هاي RT-PCR، الايزا، SDS-PAGE و وسترن بلات حاصل از كلون ‌ها، نشان دهنده بيان اين پروتئين در رده سلولي CHO بود. كاهش 3 الي 4 برابري در زمان انعقاد نشان‌ دهنده وجود فعاليت بيولوژيكي فاكتور VII نوتركيب بيان شده بود.
نتيجه گيري: سالانه حدود 4000 الي 6000 ويال (33600 تا 50400 ميلي گرم) از اين فرآورده وارد كشور مي ‌شود كه دولت را متحمل هزينه بسيار بالايي مي ‌كند. بنابراين توليد فاكتور
VII نوتركيب با استفاده از فناوري DNA نوتركيب در سطح آزمايشگاهي، مي ‌تواند اولين گام در راه فايق آمدن بر مشكلات فوق باشد.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط:  
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 
ارتباط خیلی زیاد ارتباط زیاد مرتبط ارتباط کمتر
 
ارجاعات: 
  • ثبت نشده است
 
استنادات: 
  • ثبت نشده است
 
+جهت ارجاع به این مقاله کلیک کنید(Cite).
APA : کپی

حلبیان، ر.، و شاگردی اسماعیلی، ن.، و اوودی، آ.، و مسروری، ن.، و امیری زاده، ن.، و موسوی حسینی، م.، و قره باغیان، ا.، و رضوان، ح.، و جلیلی، م.، و حبیبی رودکنار، م. (1388). جداسازی, کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO. پژوهشی خون, 6(1 (پیاپی 22)), 1-11. https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=91059



Vancouver : کپی

حلبیان راحله، شاگردی اسماعیلی ناصر، اوودی آرزو، مسروری ناصر، امیری زاده ناصر، موسوی حسینی میرکامران، قره باغیان احمد، رضوان حوری، جلیلی محمدعلی، حبیبی رودکنار مهریار. جداسازی, کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO. پژوهشی خون. 1388 [cited 2021October16];6(1 (پیاپی 22)):1-11. Available from: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=91059



IEEE : کپی

حلبیان، ر.، شاگردی اسماعیلی، ن.، اوودی، آ.، مسروری، ن.، امیری زاده، ن.، موسوی حسینی، م.، قره باغیان، ا.، رضوان، ح.، جلیلی، م.، حبیبی رودکنار، م.، 1388. جداسازی, کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO. پژوهشی خون, [online] 6(1 (پیاپی 22)), pp.1-11. Available: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=91059.



 

 
چکیده انگلیسی بازدید یکساله 187 مباني نظري و تجربي ونداليسم: مروري بر يافته هاي يك تحقيق
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی