بررسي برخي فاکتورهاي موثر در انتقال ژن به گياه دو پايه ترشک (.Rumex acetosa L)

ترشک (Rumex Acetosa L.)، گياه دوپايه مدل براي مطالعات ژنتيکي و مولکوي تعيين جنسيت مي باشد. در اين تحقيق، انتقال ژن گزارشگر gus به وسيلهAgrobacterium tumefaciens  به ريزنمونه هاي برگ اين گياه، بر اساس بيان موقت اين ژن بررسي شد. سه نژاد LBA4404، C58 و EHA اگروباکتريوم و دو نوع سوسپانسيون باکتري (سوسپانسيون I: باکتري کشت داده شده در محيط کشت LB با PH معادل 7 و سوسپانسيون II: رسوب باکتري معلق در محيط کشت MS حاوي 100 ميلي مولار استوسيرينگون با PH معادل 5.2) به صورت فاکتوريل در قالب طرح کاملا تصادفي با 3 تکرار مورد ارزيابي قرار گرفتند. سه زمان مختلف 0، 2 و 4 روز پيش کشت ريزنمونه ها نيز آزمايش شد. نتايج نشان داد که بين سه نژاد باکتري تفاوت آماري معني داري وجود ندارد حال آن که سوسپانسيون I و ريز نمونه هاي بدون پيش کشت، کارايي بالاتري در انتقال ژن به اين گياه دارند. با توجه به نتايج فوق، آزمايش هاي انتقال پايدار ژن با روزهاي مختلف هم کشتي انجام شد و مشخص شد 4 روز هم کشتي، مناسب تر از 2 روز هم کشتي براي انتقال ژن به ترشک مي باشد. گياهان تراريخت احتمالي با آزمون هيستوشيميايي GUS و هم چنين واکنش زنجيره اي پليمراز، بررسي شدند. نتايج نشان داد که تعدادي از اين گياهان، حداقل يک نسخه از ژن يا ژن هاي انتقالي را در مقايسه با گياهان شاهد دارا هستند.