تشخيص سريع و اختصاصي سالمونلا تيفي موريوم با استفاده از روش واکنش زنجيره اي پليمراز- الايزا (PCR_ELISA)

هدف: سالمونلا تيفي موريوم يکي از بيماري زاهاي مهم غذايي است که باعث ايجاد گاستروانتريت مي شود. در اين تحقيق روش PCR-ELISA براي شناسايي سالمونلا تيفي موريوم به کار گرفته شده است.
مواد و روش ها: ژن rfb، که مسوول بيوسنتز آنتي ژن O از ليپوپلي ساکاريد باکتري است، به عنوان توالي هدف انتخاب گرديد. آغازگرهاي تعيين شده منجر به تکثير قطعه 882 جفت بازي براي گونه سالمونلا تيفي موريوم شد. نمونه هاي غذايي آلوده به باکتري سالمونلا تيفي موريوم و همچنين نمونه هاي باليني و گونه هاي استاندارد مورد بررسي و آزمايش قرار گرفت. محصول PCR به طور تصادفي با ديگوکسي ژنين نشان دار و به کف ظرف هاي داراي استرپتواويدين منتقل و به روش الايزا و با استفاده از آنتي بادي ضد ديگوکسي ژنين مورد بررسي قرار گرفت. از کاوشگر داخلي نشان دار با بيوتين نيز براي تاييد محصول PCR استفاده گرديد.
نتايج: اختصاصي بودن روش با بررسي 20 نمونه سالمونلا و 6 نمونه غير سالمونلا ارزيابي شد که فقط نتايج گونه تيفي موريوم مثبت و بقيه گونه ها منفي بود. الايزا دقت و حساسيت روش PCR را تا حدود 1000 برابر افزايش داد.
نتيجه گيري: روش ارايه شده در اين تحقيق با توجه به طولاني بودن روش هاي مرسوم کشت، براي تاييد وجود باکتري در نمونه هاي باليني و غذايي مي تواند يک شيوه تشخيصي حساس و کارآمدي براي شناسايي و غربالگري سالمونلا تيفي موريوم باشد. روش حاضر در غربالگري هاي وسيع با توجه به حساسيت بالا مي تواند ضمن تشخيص اختصاصي تر، جايگزين خوبي براي PCR باشد.