نسخه جدید سایت SID.ir

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
 
عنوان مقاله: 

کلون کردن، بيان و شناسايي پروتئين P35 توکسوپلاسما گوندي در اشريشياکلي

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* بیمارستان سینا، آزمایشگاه بالینی
 
چکیده: 
هدف: ساختن پلاسميد نو ترکيب pGEX-P35، بيان ژن کد کننده آنتي ژن سطحي P35 تک ياخته و ارزيابي اوليه توانايي پروتئين حاصل از بيان ژن در رديابي آنتي بادي هاي اختصاصي توکسوپلاسما گوندي.مواد و روش ها: قطعه اي DNA حاوي 450 نوکلئوتيد از ژن P35 به وسيله PCR تکثير و در وکتور pGEM-T کلون و تعيين سکانس شد. سپس ژن مذکور با آنزيم هاي Sall و BamHl که در قسمت '5 پرايمرهاي آن تعبيه شده بود از وکتور pGEM-T جدا و در وکتور pGEX-4T-1 ساب کلون شد. براي تاييد اينکه وکتور نو ترکيب قادر است P35 را در باکتري بيان کند، اين وکتور به سويه BL21 اشريشيا کلي ترانسفرم و عمل بيان ژن انجام شد. پروتئين نو ترکيب توليد شده خالص و با روشهاي SDS-PAGE و Westernblotting بررسي شد.يافته ها: محصول PCR به صورت نوار DNA حاوي 450 نوکلئوتيد بر روي ژل آگاروز 1 درصد مشاهده شد. پس از کلون شدن محصول PCR در pGEM-T، نتايج حاصل از تعيين سکانس با داده هاي موجود در GenBank مقايسه شد که تفاوتي وجود نداشت. پس از قرار گرفتن قطعه ژن در وکتور بيان، نتيجه آناليز آنزيمي نشان داد که قطعه ژن مذکور با جهت صحيح در وکتور قرار گرفته است. پس از بيان ژن و خالص سازي پروتئين، انجام گرفتن SDS- PAGE نوار پروتئيني 42kDa حاصل از بيان را نشان داد. آناليز به وسيله وسترن بلات با استفاده از آنتي بادي موشي بر عليه سويه RH توکسوپلاسما گوندي نشان داد که پروتيين نو ترکيب توليد شده به وسيله آنتي بادي شناسايي مي شود.نتيجه گيري: در اين مطالعه قسمتي از ژن کد کننده آنتي ژن سطحي اختصاصي تاکي زوييت توکسوپلاسما گوندي کلون، بيان و تعيين سکانس شد. سکانس مذکور تاييد مي کند اختلاف سکانس ميان ژن هاي توکسوپلاسما، هر چند از نقاط مختلف جغرافيايي باشند ناچيز است. اين سکانس با شماره شناسايي DQ092625 در بانک ژن به ثبت رسيد.
 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط:  
 
مقالات همایشی مرتبط: 
  • ندارد
 
طرح های مرتبط: 
  • ندارد
 
مقالات بین المللی مرتبط: 
 
ارتباط خیلی زیاد ارتباط زیاد مرتبط ارتباط کمتر
 
ارجاعات: 
  • ثبت نشده است
 
استنادات: 
  • ثبت نشده است
 
+جهت ارجاع به این مقاله کلیک کنید(Cite).
APA : کپی

کواکب، پ.، و کاظمی، ب.، و درستکارمقدم، د. (1385). کلون کردن, بیان و شناسایی پروتئین P35 توکسوپلاسما گوندی در اشریشیاکلی. یاخته, 8(3 (31) (ویژه نامه انگلیسی)), 190-195. https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=55678



Vancouver : کپی

کواکب پرویز، کاظمی بهرام، درستکارمقدم داوود. کلون کردن, بیان و شناسایی پروتئین P35 توکسوپلاسما گوندی در اشریشیاکلی. یاخته. 1385 [cited 2022August19];8(3 (31) (ویژه نامه انگلیسی)):190-195. Available from: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=55678



IEEE : کپی

کواکب، پ.، کاظمی، ب.، درستکارمقدم، د.، 1385. کلون کردن, بیان و شناسایی پروتئین P35 توکسوپلاسما گوندی در اشریشیاکلی. یاخته, [online] 8(3 (31) (ویژه نامه انگلیسی)), pp.190-195. Available: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=55678.



 

 
چکیده انگلیسی بازدید یکساله 339 مباني نظري و تجربي ونداليسم: مروري بر يافته هاي يك تحقيق
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی