نسخه جدید سایت SID.ir

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
زمستان 1398 , دوره  23 , شماره  1 ; از صفحه 27 تا صفحه 32 .
 
عنوان مقاله: 

کلونینگ و بیان ژن اینترلوکین15 در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE3)

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* بخش ویروس شناسی مولکولی، انستیتوپاستور ایران، تهران، ایران
 
چکیده: 
اینترلوکین15 (IL-15)، سایتوکاینی است که به واسطه فعالیت های فیزیولوژیکی آن می تواند در درمان های ضدسرطان نقش ایفا کند. IL-15 باعث تمایز، تکثیر، فعال شدن و بقای سلول های کشنده طبیعی می شود و بقای لنفوسیت های T خاطره ای را بهبود می بخشد. از آنجایی که راندمان تولید و تخلیص این سایتوکاین عمدتا پایین است، علی رغم پیشرفت های اخیر، همچنان بهینه کردن شرایط تولید، ارزشمند است. بنابراین در مطالعه حاضر، اقدام به کلون و بیان ژن IL-15 انسانی در باکتری متفاوت با سویه های قبلی شد و به جای بیان در باکتری E. coli سویه رایج BL21، از سویه Rosetta (DE3) استفاده شد که قادر است با استفاده از کدون های نادری که در باکتری کمتر مورد استفاده قرار می گیرند، بیان ژن های یوکاریوتی را بهتر از سویه های دیگر انجام دهد، به طوری که پروتیین بیان شده شباهت بیشتری به پروتیین انسانی داشته باشد. پس از سنتز ژن IL-15، توالی مورد نظر در وکتور بیانی باکتریال pET28a کلون شد و پس از تایید با کلنیPCR، هضم آنزیمی با آنزیم های BamHI و XhoI و مشاهده باند 391 بازی روی ژل آگارز و تعیین توالی، در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE) ترانسفورم شد. القای بیان در جذب نوری 6/0 در OD600 و در حضور 1میلی مولار ایزوپروپیل-بتا-دی-تیوگالاکتوپیرانوزید (IPTG) انجام شد. مشاهده باند 15کیلودالتونی روی ژل SDS-PAGE و سپس انجام وسترن بلات به کمک آنتی بادی اختصاصی تجاری علیه IL-15، نشان از درستی فرآیند بیان داشت. راندمان بیان به کمک دانسیتومتری با نرم افزار Fiji حدود 37% تخمین زده شد. با توجه به اینکه بیان ژن انسانی IL-15 در سویه باکتریایی E. coli Rosetta (DE3) انجام شده است، انتظار می رود که در مطالعات بعدی، عملکرد مناسبی از خود نشان دهد. . .
 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط:  
 
مقالات همایشی مرتبط: 
  • ندارد
 
طرح های مرتبط: 
 
مقالات بین المللی مرتبط: 
  • No item.
 
ارتباط خیلی زیاد ارتباط زیاد مرتبط ارتباط کمتر
 
ارجاعات: 
  • ثبت نشده است
 
استنادات: 
  • ثبت نشده است
 
+جهت ارجاع به این مقاله کلیک کنید(Cite).
APA : کپی

بحرالعلومی شاپورآبادی، م.، و آرش کیا، آ.، و محجل، ن.، و روحوند، ف.، و آزادمنش، ک. (1398). کلونینگ و بیان ژن اینترلوکین15 در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE3). پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس), 23(1 ), 27-32. https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=545776



Vancouver : کپی

بحرالعلومی شاپورآبادی مینا، آرش کیا آرش، محجل نصیر، روحوند فرزین، آزادمنش کیهان. کلونینگ و بیان ژن اینترلوکین15 در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE3). پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس). 1398 [cited 2022May29];23(1 ):27-32. Available from: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=545776



IEEE : کپی

بحرالعلومی شاپورآبادی، م.، آرش کیا، آ.، محجل، ن.، روحوند، ف.، آزادمنش، ک.، 1398. کلونینگ و بیان ژن اینترلوکین15 در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE3). پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس), [online] 23(1 ), pp.27-32. Available: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=545776.



 

 
چکیده انگلیسی بازدید یکساله 99 مباني نظري و تجربي ونداليسم: مروري بر يافته هاي يك تحقيق
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی