برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
شهريور 1395 , دوره  10 , شماره  6 ; از صفحه 13 تا صفحه 23 .
 
عنوان مقاله: 

زيرهمسانه سازي و بررسي بيان ژن صناعي ناحيه اتصالي نوروتوکسين بوتولينوم تيپ BD/A) A)

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین (ع)، تهران، ایران
 
چکیده: 

زمينه و هدف: سندرم بوتوليسم توسط نوروتوکسين باکتري کلستريديوم بوتولينوم ايجاد مي شود. اين نوروتوکسين داراي 7 سروتيپ از A-G مي باشد. بهترين روش براي پيشگيري از سندرم حاصل از نوروتوکسين بوتولينوم (BoNT)، استفاده از واکسن هاي نوترکيب ساخته شده از ناحيه اتصالي آن (به علت داشتن اپي توپ هاي کافي براي تحريک سيستم ايمني) مي باشد. در اين مطالعه ناحيه اتصالي نوروتوکسين بوتولينوم تيپ (BoNT/A) A بررسي گرديد
روش بررسي: در ابتدا ژن ناحيه
BoNT/A از GenBank با شماره دسترسي CP 000727.1 تهيه و بر اساس ترجيح کدوني E. coli، بهينه سازي کدون انجام شد. سپس در پلاسميد pET28a، سنتز و بعد از آن در پلاسميد بياني pGEX-4T-1، زيرهمسانه سازي شد. زيرهمسانه سازي با استفاده از روش PCR با آنزيم Pfu DNA polymerase و سپس برش دوگانه با آنزيم هاي XmaI و XhoI انجام گرفت. از سويه E. coli BL 21 به عنوان ميزبان براي بيان استفاده شد. مارکر انتخابي براي pGEX-4T- 1، آمپي سيلين بود.
يافته ها: روش هاي
PCR و برش محدودکننده با آنزيم هاي ذکرشده، زيرهمسانه سازي را تاييد کردند. بررسي بيان با استفاده از روش هاي SDS-PAGE و وسترن بلاتينگ (با استفاده از آنتي بادي اسبي ضد BoNT/A)، سپس کروماتوگرافي تمايلي گلوتاتيون انجام گرفت. با اينکه زيرهمسانه سازي با موفقيت انجام شد، ولي با به کارگرفتن روش هاي ذکرشده، هيچ گونه بيان پروتئين مشاهده نشد.
نتيجه گيري: بر اساس نتايج اين مطالعه، به نظر مي رسد بايد ميزبان هاي ديگري مانند ميزبان هاي يوکاريوتي براي بيان نوترکيب ناحيه اتصالي نوروتوکسين بوتولينوم تيپ
A مورد استفاده قرار گيرند.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 90
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی