برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
 
عنوان مقاله: 

جداسازي پلاسماسل از خون محيطي و هم کشتي با سلول استروماي مغز استخوان به منظور کشت طولاني مدت

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
 
چکیده: 

مقدمه: فن اوري تهيه انتي بادي بر پايه تک سلول B روشي نوين در تهيه انتي بادي مونوکلونال انساني محسوب مي گردد. مهم ترين بخش اين فن اوري، کشت طولاني مدت پلاسماسل جدا شده از خون جهت ترشح انتي بادي است. با توجه به اين که دليل زنده ماندن طولاني مدت پلاسماسل ها در مغز استخوان حضور سيگنال هاي اطراف ان ها است، جهت کشت پلاسماسل درشرايط In vitro لازم است اين سيگنال ها به واسطه حضور يک لايه سلول تغذيه کننده تامين شوند. به نظر مي رسد که از ميان انواع مختلف اين سلول ها، سلول هاي استروماي مغز استخوان (BMSCs يا Bone marrow stromal cells) گزينه مناسب تري جهت هم کشتي با پلاسماسل محسوب مي گردند. هدف از اين پژوهش، جداسازي پلاسماسل هاي ترشح کننده انتي بادي از خون محيطي و زنده نگهداشتن ان ها در شرايط In vitro مي باشد.
روش ها: پس از تزريق واکسن کزاز، تيتر انتي بادي در سرم خون افراد داوطلب با روش
(Enzyme-linked immunosorbent assay) ELISA اندازه گيري شد PBMCs ((Peripheral blood mononuclear cells جدا شده از خون فرد ايمن با آنتي بادي هاي رنگي اختصاصي سه نشانگر سطحي 45CD، 19CD و 38CD رنگ اميزي شدند. پس از ان پلاسماسل ها به روش FACS ((Fluorescence-activated cell sorting از ساير جمعيت هاي سلولي موجود، جدا و در پليت 96 خانه اي Sort شدند. سپس همراه با يک لايه BMSCs کشت داده شدند. پس از گذشت 10 روز، از پلاسماسل ها RNA استخراج شد و واکنش RT-PCR ( (Reverse transcription polymerase chain reactionبا استفاده از پرايمرهاي اختصاصي ژن انتي بادي انجام شد.
يافته ها: روز ششم پس از واکسيناسيون، تيتر انتي بادي سرم،
IU/ml 16به دست امد که نشان از پاسخ ايمني بسيار مناسب در مقابل واکسن کزاز بود. همچنين، آناليز فلوسايتومتري نمونه خون محيطي فرد ايمن شده در روز هفتم، درصد پلاسماسل موجود در PBMCs را حدود 0.3 درصد نشان داد. در نتيجه انجام واکنش RT-PCR با پرايمرهاي اختصاصي ژن انتي بادي، قطعه VH ((Variable heavy chain به طولbp 400  تکثير شد. اين نتيجه، زنده بودن پلاسماسل ها و همچنين بيان ژن انتي بادي را در روز دهم در شرايط هم کشتي با BMSCs تاييد نمود.
نتيجه گيري: حاصل اين پژوهش، فراهم اوردن شرايط مناسب به منظور کشت پلاسماسل براي مدت 10 روز در محيط
In vitro بود. بنابراين بخشي از فن اوري نوين تهيه انتي بادي بر پايه تک سلول B نيز پايه گذاري شد. نتايج به دست امده در اين پژوهش شامل درصد پلاسماسل موجود در PBMCs و اندازه قطعه ژني VH تکثير شده، با ساير مطالعات انجام شده در اين زمينه مطابقت داشت.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط:  
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 
ارتباط خیلی زیاد ارتباط زیاد مرتبط ارتباط کمتر
 
ارجاعات: 
  • ثبت نشده است
 
استنادات: 
  • ثبت نشده است
 
+جهت ارجاع به این مقاله کلیک کنید(Cite).
APA : کپی

بزاز، م.، و فلاح مهرآبادی، ج.، و مهدوی، م.، و زین الدینی، م. (1393). جداسازی پلاسماسل از خون محیطی و هم کشتی با سلول استرومای مغز استخوان به منظور کشت طولانی مدت. مجله دانشکده پزشکی اصفهان, 32(282), 534-543. https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=221046



Vancouver : کپی

بزاز معصومه، فلاح مهرآبادی جلیل، مهدوی مهدی، زین الدینی مهدی. جداسازی پلاسماسل از خون محیطی و هم کشتی با سلول استرومای مغز استخوان به منظور کشت طولانی مدت. مجله دانشکده پزشکی اصفهان. 1393 [cited 2021October28];32(282):534-543. Available from: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=221046



IEEE : کپی

بزاز، م.، فلاح مهرآبادی، ج.، مهدوی، م.، زین الدینی، م.، 1393. جداسازی پلاسماسل از خون محیطی و هم کشتی با سلول استرومای مغز استخوان به منظور کشت طولانی مدت. مجله دانشکده پزشکی اصفهان, [online] 32(282), pp.534-543. Available: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=221046.



 

 
چکیده انگلیسی بازدید یکساله 224 مباني نظري و تجربي ونداليسم: مروري بر يافته هاي يك تحقيق
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی