برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
 
عنوان مقاله: 

امتزاج و همسانه سازي نواحي اتصال دهنده نوروتوكسين هاي بوتولينوم تيپ A و B

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین (ع)، تهران، ایران
 
چکیده: 

نوروتوكسين هاي بوتولينوم (BONTs) توكسين هاي باكتريايي نيرومندي هستند كه در غلظت هاي فمتومولار با جلوگيري از آزاد شدن انتقال دهنده عصبي استيل كولين سبب ايجاد فلج عضلاني شل مي گردند. هر نوروتوكسين متشكل از يك زنجيره سبك 50 كيلودالتوني و يك زنجيره سنگين 100 كيلو دالتوني است. ناحيه انتهاي كربوكسيلي زنجيره سنگين كه سبب اتصال نوروتوكسين به گيرنده هاي ويژه سطح سلولي مي گردد ناحيه اتصال دهنده نام گذاري شده است. اين ناحيه از توانايي ايمني زايي قابل ملاحظه اي نيز برخوردار است. در اين مطالعه ژن هاي نواحي اتصال دهنده نوروتوكسين تيپ هاي A و B به منظور توليد پروتئين نوتركيب كايمر به عنوان كانديد واكسن دو ظرفيتي به يگديگر متصل شدند. بدين منظور از ژن هاي صناعي نواحي اتصال دهنده نوروتوكسين هاي تيپ A و B در حامل بياني (+) pET28a استفاده شد. براي ژن ناحيه اتصال دهنده نورتوكسين بوتولينوم تيپ B پرايمر پيشرو حامل جايگاه برشي NcoI و پرايمر پيرو حامل جايگاه برشي NdeI طراحي گرديد. با استفاده از آنزيمpfu ، ژن ياد شده مورد تكثير قرار گرفت. در مرحله بعد برش آنزيمي محصولات PCR و ناقل نوتركيب حاوي ژن ناحيه اتصال دهنده نوروتوكسين بوتولينوم تيپ A با استفاده از آنزيم هاي NcoI و NdeI انجام شد. سپس با استفاده از آنزيم T4 DNA ligase الحاق ژن مورد نظر در ناقل (+) pET28a حاوي ژن ناحيه اتصال دهنده نوروتوكسين بوتولينوم تيپ A انجام گرفت. در مرحله آخر، حامل نوتركيب حاوي ژن كايمر به باكتري E.coli DH5a انتقال داده شد. نتايجPCR ، برش آنزيمي و تعيين توالي سازه نهايي بيانگر صحت اتصال دو ژن به يكديگر بود.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
-
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  بازدید یکساله 107
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی