برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
مهر 1390 , دوره  21 , شماره  84 ; از صفحه 23 تا صفحه 31 .
 
عنوان مقاله: 

جدا نمودن ژن تنظيمي استرپتومايسين فاقد پروموتر [StrR2] از استرپتومايسز گريزئوس

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* اصفهان، دانشگاه اصفهان، دانشکده علوم، گروه زیست شناسی
 
چکیده: 

سابقه و هدف: استفاده از PCR براي شناسايي و جدا نمودن ژن ‌ها يک روش نسبتا سريع و دقيق مي باشد. نكته قابل تامل در اين تكنيک هدفمند طراحي نمودن پرايمرهاي مورد استفاده مي‌ باشد. پرايمرها طوري طراحي مي ‌شوند كه نه تنها ويژگي‌ هاي ژنوم در نظر گرفته شود، بلكه كلونينگ ژن نيز منظور و يا به عبارت ديگر تسهيل گردد. آنتي بيوتيک استرپتومايسين توسط استرپتومايسز گريزئوس با به كار بردن دسته ژني Str با بيش از 25 ژن توليد مي ‌شود. اين دسته ژني داراي ژن StrR است كه پروتئين تنظيم کننده اختصاصي اين دسته ژني را کد مي ‌نمايد. هدف از اين تحقيق جدا نمودن ژن StrR2 بدون پروموتر آن و سپس كلونينگ آن بود.
مواد و روش ها: جهت جدا نمودن ژن
StrR بدون پروموتر ذاتي خود، StrR2 فاقد پروموتر آغازگرهاي مختلفي طراحي گرديد. يک جفت از اين آغازگرها (St Nes)، ژن StrR را در ژنوم شناسايي كرد و همچنين Nested-PCR براي شناسايي ژن StrR2 تکثير شده نيز به کار رفت. در ساير آغازگرها (Str nP2 و Str nP1) جايگاه ‌هاي BamHI و XbaI طراحي شد، اين آغازگرها نه تنها ژن StrR2 را تکثير كردند، بلكه جايگاه ‌هاي برش آنزيمي در قطعات تکثير شده را نيز ايجاد كردند.
يافته ها: ژن
StrR2 فاقد پروموتر با استفاده از PCR تكثير گرديد و ساختار آن مورد تاييد قرار گرفت. كلونينگ اين ژن به‌ طور موفقيت آميز صورت گرفت. سپس ساختار پلاسميدهاي نوترکيب با استفاده از روش ‌هاي مختلف چون الکتروفورز،PCR  و هضم آنزيمي مورد تاييد قرار گرفت.
استنتاج: با استفاده از اين وکتور مي ‌توان ژن StrR2 فاقد پروموتر را در وکتورهاي ويژه استرپتومايسز که واجد پروموترهاي القايي هستند ساب کلون نمود.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 82
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی