برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
اطلاعات شماره: 
 
عنوان مقاله: 

توليد، تخليص و تعيين برخي خصوصيات فيزيكوشيميايي آنزيم D- گلوكز اكسيداز از منبع قارچي آسپرژيلوس نيجر

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* گروه بیوشیمی بالینی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
 
چکیده: 

هدف: آنزيم گلوکزاکسيداز، واکنش اکسيداسيون -D گلوکز و تبديل آن را به گلوکونيک اسيد و H2O2 کاتاليز مي کند. آسپرژيلوس نيجر از جمله منابع مهم توليد اين آنزيم است. در اين تحقيق روش انتخاب نمونه هاي آسپرژيلوس نيجر با قدرت بالا در توليد آنزيم گلوکزاکسيداز، روش بهينه سازي محيط کشت مايع از نظر توليد آنزيم، روش تخليص آنزيم از شيره سلولي و محيط کشت و نيز برخي از خصوصيات فيزيکوشيميايي آنزيم تخليص شده ارايه و با آنزيم استاندارد مقايسه شد.
مواد و روشها: 17 نمونه آسپرژيلوس نيجر طي دو مرحله از نظر توليد آنزيم گلوکزاکسيداز غربال شد. در مرحله اول انتخاب، نمونه هاي قارچي در محيط کشت تشخيصي غير اختصاصي کشت داده شد. در مرحله دوم، نمونه هاي انتخاب شده در محيط کشت تشخيصي اختصاصي، که توانايي بالايي در شناسايي نمونه هاي با قدرت توليد بالاي آنزيم دارد، کشت داده شد و نمونه NRRL-3 براي مراحل بهينه سازي محيط کشت مايع از نظر توليد آنزيم انتخاب شد. بهينه سازي به روش يک متغير در يک زمان انجام شد و فعاليت ويژه آنزيمي از 0.172 به 0.22 رسيد. سپس نمونه  NRRL-3 به منظور توليد مقدار بالاي آنزيم، تحت شرايط بهينه شده در بيوراکتور کشت داده شد و پس از طي زمان انکوباسيون، محيط کشت و ميسليوم جمع آوري و براي طي مراحل تخليص مورد استفاده قرار گرفت.
نتايج و بحث: پس از انجام دادن مراحل تخليص، که شامل کروماتوگرافيهاي تعويض يوني بر روي -DEAE سلولز، فيلتراسيون بر روي سفاکريل S-300 و تعويض يوني بر روي -DEAE سفاروز CL-6B بود. فعاليت ويژه آنزيمي در شيره سلولي از 0.22 به 9.6 و در محيط کشت از 0.17 به 14.8 رسيد. بازده روش تخليص 9% و مرتبه خلوص آنزيم از شيره سلولي 89 و از محيط کشت 87 بود. وزن مولکولي آنزيم تخليص شده در حالت دناتوره شده در حدود 80KD و 160KDa در حالت طبيعي تخمين زده شد. pH اپتيم براي فعاليت آنزيم بين 5.6 تا 5.8 بود. پس از بررسي اثر مهارکننده ها مشخص شد که اورتوفتالات در غلظت 10mM  به شدت آنزيم را مهار مي کند وHg2+, Ag2+ ,Cu2+ هيدرازين و هيدروکسيل آمين همگي در غلظت  10mMاين عمل را به طور نسبي انجام مي دهند. همچنين Km آنزيم براي گلوکز 37mM تعيين شد.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط:  
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 
ارتباط خیلی زیاد ارتباط زیاد مرتبط ارتباط کمتر
 
ارجاعات: 
  • ثبت نشده است
 
استنادات: 
  • ثبت نشده است
 
+جهت ارجاع به این مقاله کلیک کنید(Cite).
APA : کپی

صاحب قدم لطفی، ع.، و هخامنشی، م.، و یادگاری، م.، و مصباح نمین، س. (1381). تولید, تخلیص و تعیین برخی خصوصیات فیزیکوشیمیایی آنزیم D- گلوکز اکسیداز از منبع قارچی آسپرژیلوس نیجر . پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس), 5(1), 65-74. https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=13837



Vancouver : کپی

صاحب قدم لطفی عباس، هخامنشی محمدسعید، یادگاری محمدحسین، مصباح نمین سیدعلیرضا. تولید, تخلیص و تعیین برخی خصوصیات فیزیکوشیمیایی آنزیم D- گلوکز اکسیداز از منبع قارچی آسپرژیلوس نیجر . پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس). 1381 [cited 2021July28];5(1):65-74. Available from: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=13837



IEEE : کپی

صاحب قدم لطفی، ع.، هخامنشی، م.، یادگاری، م.، مصباح نمین، س.، 1381. تولید, تخلیص و تعیین برخی خصوصیات فیزیکوشیمیایی آنزیم D- گلوکز اکسیداز از منبع قارچی آسپرژیلوس نیجر . پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس), [online] 5(1), pp.65-74. Available: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=13837.



 

 
چکیده انگلیسی بازدید یکساله 328 مباني نظري و تجربي ونداليسم: مروري بر يافته هاي يك تحقيق
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی