5 SID.ir | كشت ياخته‌ هاي شناور هلا براي توليد آنتي‌ ژنهاي ويروسي
برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
عنوان مقاله: 

كشت ياخته‌ هاي شناور هلا براي توليد آنتي‌ ژنهاي ويروسي

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* تهران، دانشگاه تربیت مدرس، دانشکده پزشکی، گروه ویروس‌شناسی
 
چکیده: 

هدف: راه‌اندازي كشت ياخته‌هاي هلا به منظور توليد آنتي‌ژنهاي ويروسي
مواد و روشها: ياخته‌هاي پايدار هلا (HeLa) ابتدا به صورت تك لايه كشت و سپس به ظروفي كه براي كشت ياخته‌هاي شناور طراحي شده بود انتقال داده شدند. براي رشد ياخته‌ها از محيطMinimum Essential Medium (MEM)  كه حاوي ده درصد سرم استريل گوساله بود استفاده شد. براي دستيابي به بهترين شرايط رشد ياخته‌ها، از بافر HEPES و براي حذف كلسيم، از كوبركسي متيل سلولز (CMC) و اتيلن دي آمين تترااستيك اسيد (EDTA) استفاده شد. پس از عادات دادن ياخته‌ها به كشت شناور، از آنها براي تكثير ويروسهاي پوليوتيپ 1، 2، 3 و ويروس آدنوتيپ 5 استفاده شد و نتايج بدست آمده با آنچه از كشت ياخته‌هاي تك لايه به دست آمده بود مقايسه شد.
يافته‌ها: زمان دو برابر شدن ياخته‌هاي هلا در كشت تك لايه و كشت شناور با اپتيمم تعداد ياخته‌هايي كه براي شروع كار مورد استفاده قرار مي‌گيرد ارتباط ويژه‌اي دارد. بهترين تعداد براي كشت اين ياخته‌ها در پليتهاي 96 خانه‌اي استفاده از 300000 ياخته در يك ميلي‌ليتر محيط كشت، و براي كشت معلق استفاده از 400000 در هر ميلي‌ليتر محيط است. زمان دو برابر شدن براي كشت تك لايه حدود 38 ساعت بود و تا 80 ساعت بعد از شروع كشت، ياخته‌ها در فاز لگاريتمي تكثير قرار داشتند، ولي فاز لگاريتمي تكثير براي تكثير ياخته‌هاي معلق حداكثر 48 ساعت بود. هر دو كشت ياخته‌ها توانستند شرايط لازم را براي تكثير ويروسهاي پوليو و آدنو 5 فراهم كنند.
نتيجه‌گيري: براي دستيابي به كشت ياخته‌هاي شناور هلا لازم است تا غلظت يون كلسيم تا 8/3 برابر كاهش يابد، محيط كشت حاوي ياخته‌ها 70 بار در دقيقه چرخانده و هوادهي مناسب انجام مي‌شود، ولي به وجود CMC احتياجي نيست. توانايي تكثير ويروسهاي پوليوتيپ 1، 2، 3 و ويروس آدنوتيپ 5 در ياخته‌هاي تك لايه و معلق هلا يكسان است.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
-
 
ارجاعات: 
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 134
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی