4 SID.ir | ترانسفكت كردن سلول هاي بنيادي خون ساز انسان به وسيله سازه هدف گيري ژني حاوي ژن بتاگلوبين
برای اطلاع از آخرین مقالات علمی و اخبار کرونا(COVID-19) کلیک کنید

مشخصات مقاله

عنوان نشریه: 
 
عنوان مقاله: 

ترانسفكت كردن سلول هاي بنيادي خون ساز انسان به وسيله سازه هدف گيري ژني حاوي ژن بتاگلوبين

 
نویسندگان: 
 
آدرس:  
* ایران، تهران، انستیتو پاستور ایران، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی
 
چکیده: 

هدف: جايگزيني ژن بتاگلوبين سلولهاي CD133+ با استفاده از سازه هدف گيري ژني حاوي ژن بتاگلوبين و اجزاي مورد نياز براي نوترکيبي همسان.
مواد و روش ها: پلاسميد
pFBGGT تكثير و به وسيله آنزيم هاي NheI و XhoI هضم و باند 13.3 كيلوبازي مورد نظر از روي ژل آگارز استخراج شد. سلولهاي COS-7 جهت بررسي فعاليت بيولوژيک مارکرهاي انتخاب مثبت و منفي، به وسيله پلاسميد خطي شده ترانسفکت شدند. سلولهاي بنيادي خونساز از خون بند ناف جداسازي شده و به وسيله سازه ژني با روش پليفکشن ترانسفکت شدند و مراحل انتخاب مثبت و منفي انجام گرديد. از سلولهاي باقي مانده در محيط انتخابي DNA استخراج و واکنش زنجيره اي پليمراز  (Polymerase Chain Reaction; PCR)براي تكثير قطعات هيگرومايسين، نئومايسين، تيميدين كيناز و قطعه اتصالي گذاشته شد.
يافته ها: نتايج آزمايشات، بررسي فعاليت بيولوژيك ماركرهاي مثبت و منفي نشان دهنده فعاليت ماركرها بود. قطعات هيگرومايسين، نئومايسين و قطعه اتصالي تكثير شدند ولي قطعات تيميدين كيناز 1 و 2 تكثير نشدند. نتيجه تعيين توالي محصول PCR قطعه اتصالي، تاييد کننده وقوع نوترکيبي همسان در اين سلولها بود.
نتيجه گيري: در اين تحقيق با استفاده از استراتژي جديد انتخاب مثبت و منفي دو گانه، جايگزيني ژن با استفاده از يك سازه ژني و در يك مرحله انجام شد
.

 
کلید واژه: 

 
موضوعات مرتبط: 
 
ارجاعات: 
  • ندارد
 
 
مقالات نشریه ای مرتبط: 
 
مقالات همایشی مرتبط: 
 

  چکیده انگلیسی بازدید یکساله 109
 
 
آخرین های بلاگ
ورود به بلاگ مرکز اطلاعات علمی