جداسازي فراكشن آنتي ژني 68 كيلو دالتون پروماستيگوت ليشمانياي خزنده

سابقه و هدف: ليشمانياي خزنده داراي گونه هاي متعددي با صفات متفاوت است. بررسيهاي به عمل آمده نشان داده است كه بعضي از گونه هاي اين انگل بدون ايجاد زخم، موش بالب سي را در مقابل ليشمانيا ماژور ايمن ميكنند. هدف از انجام اين تحقيق دستيابي به يك فراكشن پروتييني ليشمانياي خزنده به منظور پيشگيري از سالك مي باشد.
مواد و روشها: اين ليشمانيا از خزنده اي در استان سمنان جدا گرديد. به منظور استفاده از فراكشنهاي پروتئيني آن، انگل در آزمايشگاه كشت داده شد و پروماستيگوتهاي آن سه بار با بافر PBS شسته شدند. پس از چندين مرتبه ذوب و انجماد، با استفاده از امواج ماوراء صوت انگلها خرد شده و آنتي ژن خام تهيه گرديد. اين مخلوط پروتييني با غلظتهاي مختلف سولفات آمونيوم رسوب داده شد و فراكشنهاي پروتئيني موجود در رسوب و مايع رويي به روش SDS-PAGE مورد سنجش قرار گرفتند.
يافته ها: يك نوار پروتئيني در حدود 68 كيلو دالتون در مايع رويي پرسيپيتاسيون با غلظت 80% سولفات آمونيوم مشاهده گرديد. فراكشن مذكور از روي ستون كروماتوگرافي حاوي ژل سفادكس G100 عبور داده شد. اين پروتئين دياليز گرديد و آنتي بادي آن در خرگوش تهيه شد.
نتيجه گيري و توصيه ها: اين پروتئين خاصيت آنتي ژني داشته و مي تواند كانديد واكسن قرار گيرد.